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ChIP實(shí)驗(yàn)如何設(shè)置對(duì)照及重復(fù)?

通常ChIP過(guò)程產(chǎn)生3份DNA產(chǎn)物,Input、IgG產(chǎn)物、IP產(chǎn)物。Input是染色質(zhì)片段化后提取獲得的總DNA、未經(jīng)抗體加入免疫沉淀過(guò)程,IgG組這是用實(shí)驗(yàn)抗體的同型陰性對(duì)照抗體、作為mock IP,IP產(chǎn)物即是以實(shí)驗(yàn)抗體獲得的免疫沉淀產(chǎn)物。


在后續(xù)的qPCR檢測(cè)中,通常將IgG產(chǎn)物組作為IP產(chǎn)物組的對(duì)照。如需設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照抗體,可以選擇Histone H3或者RNA polymerase II,然后以GAPDH或Actin等作為檢測(cè)基因。


在后續(xù)的Sequence中,通常將Input組產(chǎn)物作為測(cè)序?qū)φ諛悠贰?/span>

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